抗酸染色

抗酸染色法acid－fast staining method 1882年由埃利希（F．Ehrlich），并經(jīng)F．齊爾（Ziehl）改進(jìn)而創(chuàng)造出的細(xì)菌染色法。

其中代表性的為對結(jié)核菌的齊爾-尼爾森（Ziehl－Neelsen）染色法和齊爾-加貝特（Ziehl－Gabbet）染色法。用石炭酸復(fù)紅染色后，用鹽酸乙醇分色，再用美藍(lán)進(jìn)行對比染色，即不再脫色而呈現(xiàn)石炭酸復(fù)紅的紅色。

抗酸染色的原理:

分枝桿菌的細(xì)胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì)，包圍在肽聚糖的外面，所以分枝桿菌一般不易著色，要經(jīng)過加熱和延長染色時間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后，就很難被酸性脫色劑脫色，故名抗酸染色。齊-尼氏

抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅牢固結(jié)合成復(fù)合物，用鹽酸酒精處理也不脫色。當(dāng)再加堿性美蘭復(fù)染后，分枝桿菌仍然為紅色，而其他細(xì)菌及背景中的物質(zhì)為藍(lán)色。

抗酸染色一般步驟

1）初染

用玻片夾夾持涂片標(biāo)本，滴加石炭酸復(fù)紅2-3滴，在火焰高處徐徐加熱，切勿沸騰，出現(xiàn)蒸汽即暫時離開，若染液蒸發(fā)減少，應(yīng)再加染液，以免干涸，加熱3-5分鐘，待標(biāo)本冷卻后用水沖洗。

2）脫色

3%鹽酸酒精脫色30秒~1分鐘；用水沖洗。

3）復(fù)染

用堿性美蘭溶液復(fù)染1分鐘，水洗，用吸水紙吸干后用油鏡觀察。

抗酸染色的染液配制

1、石炭酸復(fù)紅

堿性復(fù)紅酒精飽和溶液 10mL

5%石炭酸 90mL

2、3%鹽酸酒精

濃鹽酸 3mL

95%酒精 97mL

3、呂氏美蘭液

美蘭酒精飽和液 30mL

氫氧化鉀（1:10000） 100mL

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