TTC染色液

TTC染色液是TTC和活細(xì)胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶反應(yīng)，生成紅色的甲臜，用來表示細(xì)胞的活力。配制多為2%，染色要避光，37度條件下，它是評(píng)價(jià)腦缺血損傷常用的指標(biāo)。

TTC染色液技術(shù)指標(biāo)：

1 原理：TTC（2，3，5—氯化三苯基四氮唑）是脂溶性光敏感復(fù)合物，1894年*合成用來檢測(cè)種子的生存能力，1958年開始用來染色檢測(cè)哺乳動(dòng)物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體，與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色，而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降，不能反應(yīng)，故不會(huì)產(chǎn)生變化呈蒼白。

2 取腦：可麻醉后直接取腦或經(jīng)生理鹽水灌注后取腦。因?yàn)槟X組織未用多聚甲醛固定，所以較軟，取腦時(shí)更應(yīng)仔細(xì)，保持大腦的完整性。

3 －20度冰箱中速凍20分鐘左右，便于切片。

4 切片：一般切成5－6片，每隔2mm切一片。一刀在腦前極與視交叉連線中點(diǎn)處；第二刀在視交叉部位；第三刀在漏斗柄部位；第四刀在漏斗柄與后葉尾極之間。（參考：張均田，主編.現(xiàn)代藥理試驗(yàn)方法）。如果需計(jì)算面積的話，應(yīng)切得均勻或用專門的腦槽。

5 將切片置于TTC中，常規(guī)濃度為2%，也有用1%或更低濃度的。

6 用錫箔紙蓋住后，放入37C溫箱15～30min，不時(shí)翻動(dòng)腦片，使均勻接觸到染色液。也可以用將腦片放入多孔板，再滴入TTC，覆以圓形蓋玻片使均勻染色。

7 染色后效果：為皮層下梗死。

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